奶牛育种的重要性（奶业振兴，良种先行——全国首期奶牛活体采卵（OPU）培训班在京开班）

学员合影

活体采卵（ovum pick-up，OPU）是20世纪80年代初发展起来的一种新型的家畜胚胎工程技术，主要借助B超和活体采卵仪完成卵母细胞采集的一系列过程。

以奶牛活体采卵-体外受精（OPU-IVF）为代表的第三代快速技术在国内起步较晚，专业技术人才紧缺，限制了该技术的推广应用，无法满足奶业发展对良种快繁的需求。

为推进OPU技术的普及、推广和应用，北京首农畜牧发展有限公司奶牛中心联合北京东方联鸣科技发展有限公司共同举办的国内首期奶牛活体采卵（OPU）培训班于6月4-5日在北京奶牛中心延庆基地开班。

来自北京奶牛中心、现代牧业、赛科星、新希望、奥克斯种业、品元生物、光明牧业、上海奶牛育种中心流量套餐、中科花鹿农业、农垦长鑫牧场、荷斯坦牧业、天食牛种业、创源生物、中国农业大学、南京农业大学、宁夏大学、黑龙江省农垦科学院等多个企校的30多名学员共同参加了本次培训。

理论课堂

本期培训班邀请了国内家畜繁殖领域知名专家朱化彬研究员、首农畜牧奶牛中心刘成军博士以及北京东方联鸣资深技术专家左晓刚作为培训老师，通过“理论➕实操”模式，为行业培养奶牛活体采卵专业技术人才，以满足产业发展需求。

北京首农畜牧发展有限公司奶牛中心主任 麻柱

首农畜牧奶牛中心麻柱主任表示，奶牛中心做育种到今天整整50年，从事胚胎工作超过20年。2002年，全国农业农村部在延庆基地启动了“万枚胚胎工程”，自此以后，奶牛中心开始组建团队，引流量套餐进人才，开始申报国家奶牛工程技术研究中心，2004年科技部批准创建，2008年通过科技部验收，获得了“科技部国家奶牛工程技术研究中心”称号。他希望，各位学员在此次培训中能够加深对行业的了解，学有所获。胚胎工程技术在国外已经实现了商业化，我国进入时间不长，发展前景良好，希望各位学员在此次培训中能够加深对行业的了解，学有所获。

北京东方联鸣科技发展有限公司董事长 关鸣

北京东方联鸣关鸣董事长表示，东方联鸣2000年成立，到今天是23周年。公司成立初期，东方联鸣的首批OPU设备在中国落地，当时中国农科院、新疆农科院、西北大学的相关教授等都到现场见证。今天，国内规模牧场突破10吨的产量，奶牛产奶量取得目前的流量套餐成绩，和奶业工作者的努力是分不开的。OPU技术实际是从小母牛的基因检测到它的生长性、日增重等生长数据的智能检测，一直到10个月开始采卵。对10个月的小牛进行活体采卵，不仅可以赚回它的成本，还可以把牧场的经济效益提升起来。OPU技术发展到今天，科技含量更高，不仅应用于实验室，更能实际运用到牧场，帮助牧场得到更好地发展。

专家课堂，受益匪浅

中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

国家奶牛产业技术体系胚胎工程岗位科学家朱化彬

朱化彬研究员就《牛生殖器官卵泡发育及其调控》《牛体外受精技术》《牛胚胎移植技术》三个方向分别作了讲解。

他介绍到，牛原始卵泡妊娠140天，一层扁平（体）上皮细胞包裹包围初级卵母细胞，卵泡发育流量套餐阶段分为无腔卵泡和有腔卵泡，卵泡的发生和发育包括生长和分化、原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、三级或成熟卵泡。在发情期中，卵泡连续发育，在卵泡期有一个卵泡在LH峰的作用下排卵。在发情期中，有两个（或多个）一群有腔卵泡发育，即发育波，发情时的卵泡波优势在LH作用下排卵。卵泡发育波为原始卵泡库——卵泡生长发育——生长卵泡——排卵卵泡——排卵。在自然状态下，约70%在一个发情周期中有2个卵泡发育波，分别从发情周期第2天和第9～10天开始，约30%母牛在一个发情周期有3个卵泡发育波，分别从发情周期第2天、9～10天和第15～1天开始。

牛卵泡发育主要由神经激素、垂体促性腺激素、性腺激素、胎盘促性激素和其他例流量套餐如前列腺素、外激素等调节。

朱教授还就体外胚胎生产和体外胚胎的区别进行讲解。据悉体外胚胎生产即成熟卵母细胞与精子在体外完成受精过程，受精卵在体外发育至一定阶段形成胚胎的方法，而体外胚胎是指利用体外胚胎生产技术获得的胚胎。同时，他也在课堂上展示了牛体外受精技术IVF实验室。

据介绍，牛体外受精技术能够解决胚胎移植的胚胎来源问题，发挥优良品种的繁殖潜力，缩短家畜繁殖周期，加快品种改良速度，提供丰富的实验材料和必要的辅助手段，对于动物生殖机理研究、畜牧生产、医学和濒危动物保护也具有积极作用。

此外，关于牛胚胎移植的原则，朱教授提到包括生理阶段与变化相同原则、解剖位置相同原则、时间一致性原则、相同原则和无伤流量套餐害原则。对于受体牛，一般选择黄牛或者低产奶牛，青年牛13——18月龄，产后3个月母牛，同时要符合无生殖疾病的要求，特别需要注意的是，对于荷斯坦青年牛13月龄，移植前后1个月不能注射免疫疫苗和驱虫药。胚胎移植的妊娠检查方面，通常使用早孕蛋白检测、B超方法、直肠触诊等方法检测。

北京首农畜牧奶牛中心胚胎团队刘成军博士

就《胚胎室内操作技术》展开培训

刘老师指出，体外受精技术环节包括卵母细胞的获得和体外成熟、精子的优化处理和获能、成熟卵母细胞与获能精子的体外受精、受精卵的体外培养和胚胎的移植或冷冻保存等。同时，实验室环境要尽量保证稳定，实验室工作主要有日常质控、胚胎观察、卵丘卵母细胞复合体收集、成熟培养、流量套餐精子的获得及处理、体外受精、胚胎培养、胚胎移植、胚胎冷冻、液体准备和再次核对工作并清洁实验室等流程。

培训课堂，刘成军也为学员详细展示了日常质控、卵冠丘复合收集等仪器设备。

他指出，牛体外受精原理是人工模拟体内环境（包括营养、温度、PH等），在体外使卵母细胞成熟，同时使精子获能，最终完成受精过程并在体外培养获得胚胎。关于精液的优化处理，他表示，根据活力、密度、精液量选择处理方式分为常规密度梯度离心法、上游法、直接离心法。移植后剩余优质胚胎冷冻，程序化冷冻约1小时，玻璃化冷冻4—6分钟。

北京东方联鸣科技发展有限公司专家 左晓刚

就《繁育影像图例分享和实操注意事项》进行讲解

左工首先对于B超的成像进行了讲解流量套餐。B超成像为黑色，是弱的回声，超声穿透力较强（羊水、尿液、卵泡液、血液等）；B超成像为灰色，中等回声，超声穿透力较弱（肌肉、黄体、炎性分泌物等）；B超成像为白色，强性回声，超声穿透力较差（骨骼、韧带、增生物、结石等）。

接着，详细为学员展示了母牛生殖系统的形态与成像，包括子宫解剖、子宫纵横切面示例图。对于奶牛卵巢周期性发育，他表示，一般情况下，黄体的继续生长或退化可在排卵后第15天进行初步判断。持久或妊娠的表现为液体腔消失，黄体组织的密度及回声略有增强。黄体退化表现为液体腔消失，黄体组织的密度减弱或回声不均匀、不规则。要说明的是：关于有腔黄体的液体腔的大小，总的来说是随时间的延长而缩小，但并不一流量套餐定在具体的时间上有统一的标准，它与膘情、营养、胎次、环境、应激等因素有关。

此外，对于B 超诊断卵巢疾病，左工也分享了自己的体会，使用 B 超诊断卵巢疾病，需要临床经验的积累和对 B 超影象细节的捕捉和观察。一次 B 超检查往往是不够的，需要连续的跟踪和了解卵巢上的细微变化，从而判断卵巢疾病自身的发展方向。在这种情况下，合理运用激素和其他药物进行调控，取得的效果要比徒手直检的判定和用药结果要稳妥的多，好的多。B 超影象的分辨率和清晰度是至关重要的，如果看不清图象的细微变化，真实的状况将无法判定。

培训期间，他也对子宫影像及子宫疾病、妊娠诊断、胎儿早死亡情况、胎儿性别鉴定等作了介绍。

关于牛的活体采卵流量套餐技术（OPU），他表示，牛的活体采卵技术可适用不够配种年龄的小母牛，超数排卵效果差、患繁殖疾病和老龄牛，妊娠3个月以内的高产奶牛和良种肉牛。此技术可连续不断地提供卵子，缩短育种周期，充分挖掘良种牛的繁育能力，批量生产良种胚胎，还可为核移植和基因转移提供丰富的实验材料和技术手段，加速基础研究的进展。

实操课堂，学以致用

实操训练主要由左晓刚、朱庆利两位老师现场指导，分别就B超教学、穿刺操作、活体采卵等环节做专项训练，确保每位学员学到一线的真正技术。

OPU 前的准备包括，母牛固定在保定架内，牛体清洗消毒；硬膜外鞘注射2％的盐酸利多卡因2~5ml,穿刺针安放于探头上的穿刺架内，通过管路与集卵管和真空泵相流量套餐连。

活体采卵的操作主要为将牛阴道探头穿刺架润滑后送入母牛阴道内；一手固定卵巢，一手把握探头穿刺架，通过直肠把握法把卵巢固定在 B 超阴道探头前；调整卵巢和探头位置，使卵泡位于穿刺引导线上；操作者向前推动探头架上的采卵针穿刺卵泡，同时用脚踏开关启动真空泵，通过真空泵的负压将卵泡液和卵子吸入集卵管中；在收集卵子过程中集卵管保持在38℃；采卵结束后，尽快将卵泡液收集管送入实验室进行检卵和分级。

OPU仪器确保真空度：0到﹣65k Pa （相当于约0到﹣650 mbar 或0 to 488 mmHg )真空值和滞后值可由用户自己设定。真空泵通过脚踏开关控制。将卵母细胞直接吸入装有预热好的 OPU 培养基流量套餐的试管中。培养基中的卵母细胞储存在最佳温度范围内（建议+36℃至＋38℃)。默认情况下，温度设置为＋37℃。

本次OPU实操培训的设备由北京东方联鸣提供，B超型号分别为EXAPad和Easi-Scan，采卵设备为牛用活体采卵专用泵，具有操作简单、图像清晰、坚固耐用等优点，已在国内多个规模牧场和实验室中使用，深受用户推崇。

实操课堂

实操课堂

每次实操结束，大家都会回到教室交流讨论，结合理论引导，老师也会针对性答疑解惑，帮助生快速学懂学会。行业同仁纷纷表示收获颇丰、不虚此行，希望后续能与东方联鸣展开更深层次的合作。高校教师穆某表示，此次参加培训，主要目的是想了解现阶段企业发展所需要的人才，从而与时俱进，流量套餐更精准地培养学生专业能力。研究生郑某表示，此次培训对自己现阶段所研究的课题有很大帮助。

交流讨论会现场

最后，全国首期OPU培训班为每位学员颁发了结业证书，并合影留念。

合影留念

培训剪影

丨来源：乳业时报采访中心 实习记者：李娅静 霍文睿 丨本期编辑：赵博

丨校读：封斌

丨监制：张耀

丨总监制：赵敏

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